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【干货】血液DNA提取步骤

Mar 5th,2025 196 浏览量

从血液中提取DNA是分子生物学实验中的常见操作,通常用于基因检测、疾病诊断等。本文主要介绍血液DNA提取的常见步骤、常见问题及解决方法。
(一)血液DNA提取的常见步骤
1.样本准备
抗凝血处理:采集的血液样本通常使用抗凝剂(如EDTA、肝素或柠檬酸钠)防止凝固。EDTA是最常用的抗凝剂。
2.DNA提取方法
可使用酚-氯仿提取法,离心柱法试剂盒或磁珠法试剂盒进行DNA提取纯化。
离心柱法血液DNA提取试剂盒一般操作步骤如下:
1)裂解红细胞
使用红细胞裂解缓冲液去除红细胞,保留白细胞。
2)裂解细胞
将样本与裂解缓冲液混合,充分裂解细胞。
3)结合DNA
将裂解液转移到DNA结合柱中,使DNA结合到柱上。
4)洗涤
用洗涤缓冲液去除杂质。
5)洗脱DNA
用洗脱缓冲液或无菌水将DNA从柱上洗脱。
3.DNA定量与质量检测
1)定量:使用分光光度计(如NanoDrop)测定DNA浓度和纯度(A260/A280比值应在1.8-2.0之间)。或使用荧光定量仪(如Qubit)进行更精确的定量。
2)质量检测:通过琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性,观察是否有明显降解。
(二)血液DNA提取常见问题
1.DNA得量低
·样本类型、样本量、储存条件以及存放时长会影响DNA得量。
·缓冲液未按瓶子标签所示加入正确体积的乙醇。
·
缓冲液或异丙醇与样本混合不充分。
2.纯度低
·
裂解不充分,可适当增加裂解时间。
·
未按说明书标注体积加入清洗液。
·
未按说明书标注离心转速进行清洗。
3.DNA碎片化严重
·
样本存放时间过久。
·
样本反复冻融。
通过以上方法,可以从血液中高效提取高质量的DNA,用于PCR、测序、基因分型等实验。
中科百抗可提供高效、便捷的血液基因组DNA提取试剂盒(离心柱法或磁珠法),有需求欢迎咨询客服。