粪便样本中基因组DNA的提取是微生物组研究、病原体检测和遗传学分析中的重要步骤。然而，粪便样本成分复杂，包含大量宿主细胞、微生物、食物残渣和抑制剂，因此提取高质量的DNA具有一定挑战性。
本文主要介绍磁珠法粪便DNA提取试剂盒说明书中的内容，包括提取步骤、常见问题等内容，一起来看看吧。
一、粪便DNA提取试剂盒说明书之一般操作步骤
1.裂解：向研磨管中加入一定量裂解基质、粪便样品和缓冲液。如果需要去除RNA，可加入一定量RNase A以降解RNA。
2.使用下列其中一个方法进行均浆化：
·旋涡仪均浆：将装有样本和研磨珠的离心管，在涡旋仪上全速涡旋振荡5 min；
·珠磨仪均浆：不同品牌珠磨仪功率不同，应根据仪器进行参数调整。
3.对于多数微生物样本，匀浆操作完毕后，继续70℃温浴10 min；
4.将研磨后的离心管进行离心，将全部上清液转移至干净的1.5 mL离心管中，加入一定量缓冲液，上下颠倒混匀，快速涡旋后静置。
5.离心管离心后，吸取一定量上清液至新的2 mL离心管中，加入用异丙醇稀释的缓冲液和一定量磁珠，涡旋振荡。
6.将离心管置于磁力架上，静置一段时间，磁珠完全吸附后，保持磁吸状态用移液枪吸弃上清液，勿接触磁珠。
7.向离心管中加入用乙醇稀释的缓冲液，涡旋震荡清洗，磁场分离，吸弃上清液，重复2次。
8.吸弃上清液后，离心管继续保持在磁力架上，放入45~50℃烘箱中，干燥约5~10 min至无明显乙醇气味（也可室温晾干，但需要更长时间）。
9.挥发除醇结束后，向离心管中加入适量洗脱液EB，吹散或震散磁珠，置于58℃水浴锅或恒温振荡器中，加热5~10 min，期间混匀2~3次。结束后，参考步骤6进行磁场分离，将洗脱液转移至另一干净离心管中，得DNA产物，提取过程结束。
二、粪便DNA提取试剂盒说明书之常见问题
1.DNA有颜色
·样本用量过多：粪便样本富含抑制剂，可减少样品用量。
2.DNA产物纯度低
·裂解不充分：珠磨仪均浆替代涡旋仪进行机械裂解，延长裂解时间。
·样本用量太多：粪便样本富含抑制剂，减少样品用量。
中科百抗可提供高质量的粪便基因组DNA提取试剂盒，使用方便、性价比高，试剂盒具体使用方法请参考说明书。有需求欢迎咨询中科百抗。
