PolyTool™ VIS Packaging Transfection Reagent(病毒载体生产专用转染试剂)是一款功能强大的用于悬浮293细胞的高性能转染试剂,不含任何动物源成分,适用于大规模病毒载体生产。
规格:1mL
价格:询价
PolyTool™ VIS Packaging Transfection Reagent是一款功能强大的即用型转染试剂,不含任何动物源成分,可用于单质粒转染或多质粒共转染。本试剂适用于各种常见悬浮293细胞系(如悬浮HEK293等)并适用于基因与细胞治疗领域中大规模重组腺相关病毒(rAAV)载体的生产。本试剂适用于在摇瓶或生物反应器中进行悬浮293细胞的DNA转染。 |
1.细胞制备: 在细胞瞬时转染前需确定其细胞密度及存活率。为确保转染效果,建议使用处于对数生长期内且存活率大于95%的细胞转染。接种细胞并培养至适当密度,转染时密度建议在2.0×106 cells/mL。 2.细胞转染(以100 mL培养基、转染时细胞密度为2.0×106 cells/mL为例,其他转染体积用量参考产品说明书): *在开始转染程序之前,将所有组分涡旋、瞬离并平衡至室温 (1)质粒稀释液制备:将200 µg质粒(总质粒用量,建议浓度为1 μg/μL)加入5 mL无血清高糖DMEM稀释培养基中,轻轻混匀。 (2)质粒-转染试剂复合物制备:将600 µL PolyToolTM VIS Packaging Transfection Reagent转染试剂直接加入到质粒稀释液中,轻轻混匀后在室温下孵育15 min,充分反应形成质粒-转染试剂的复合物。 (3)将孵育好的质粒-转染试剂复合物直接加入培养好的待转染细胞中,轻柔混匀,将细胞置于适当的温度、摇床振幅和二氧化碳水平(例如,37°C,110 rpm,5% CO2)下继续培养细胞,转染72 h后收获病毒,并根据实际需求进行病毒纯化等后续操作。
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