PolyTool™ VIS Packaging Transfection Reagent（病毒载体生产专用转染试剂）是一款功能强大的用于悬浮293细胞的高性能转染试剂，不含任何动物源成分，适用于大规模病毒载体生产。
规格: 300 μL/1 mL/5mL
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PolyTool™ VIS Packaging Transfection Reagent是一款功能强大的即用型转染试剂，不含任何动物源成分，可用于单质粒转染或多质粒共转染。本试剂适用于各种常见悬浮293细胞系（如悬浮HEK293等）并适用于基因与细胞治疗领域中大规模重组腺相关病毒（rAAV）载体的生产。本试剂适用于在摇瓶或生物反应器中进行悬浮293细胞的DNA转染。 |
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1.细胞制备： 在细胞瞬时转染前需确定其细胞密度及存活率。为确保转染效果，建议使用处于对数生长期内且存活率大于95%的细胞转染。接种细胞并培养至适当密度，转染时密度建议在2.0×106 cells/mL。 2.细胞转染（以100 mL培养基、转染时细胞密度为2.0×106 cells/mL为例，其他转染体积用量参考表1&2）： *在开始转染程序之前，将所有组分涡旋、瞬离并平衡至室温 （1）质粒稀释液制备：将200 µg质粒（总质粒用量，建议浓度为1 μg/μL）加入5 mL无血清高糖DMEM稀释培养基中，轻轻混匀。 （2）质粒-转染试剂复合物制备：将600 µL PolyToolTM VIS Packaging Transfection Reagent转染试剂直接加入到质粒稀释液中，轻轻混匀后在室温下孵育15 min，充分反应形成质粒-转染试剂的复合物。 （3）将孵育好的质粒-转染试剂复合物直接加入培养好的待转染细胞中，轻柔混匀，将细胞置于适当的温度、摇床振幅和二氧化碳水平（例如，37°C，110 rpm，5% CO2）下继续培养细胞，转染72 h后收获病毒，并根据实际需求进行病毒纯化等后续操作。 表1.悬浮细胞转染的复合物参数
表2.根据培养参数使用的DNA转染方案
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