• PolyTool™ siRNA Transfection Reagent
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PolyTool™ siRNA Transfection Reagent

No.BM350104

PolyTool™siRNA Transfection Reagent(siRNA专用转染试剂)是一款新型、高性能的siRNA专用转染试剂。与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、效率高、稳定性好、转染操作简单、重复性好等优点。

规格: 300 μL/1 mL/5mL

价格: 询价

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产品详情

产品介绍

PolyTool™siRNA Transfection Reagent(siRNA专用转染试剂)适用范围:适用于各种常规和难转染细胞的siRNA转染。产品日常放置于2-8℃保存,可保存1年,长期不使用建议放置于-20℃。

实验流程

1.试剂准备:siRNA溶液(20 μM);

转染稀释液:无菌PBS或Opti-MEM或细胞培养液。

2.细胞种板:参考列表推荐密度接种细胞,使转染时孔板中细胞密度达到60%~70%。

3.转染前准备:转染试剂PolyToolTM siRNA Transfection Reagent与增强剂Booster提前恢复至室温后涡旋瞬离;siRNA溶液浓度为20 μM;阅读注意事项。

4.细胞转染:以12孔板为例,每孔配制50 μL转染复合物,务必按照下图加样顺序操作

(1)吸取2.5 μL siRNA溶液与12.5 μL Booster溶液充分吹打混匀;

(2)向(1)所述溶液中加入5 μL PolyToolTM siRNA Transfection Reagent溶液,充分吹打混匀;

(3)将(2)所述溶液室温孵育5分钟;

(4)孵育结束后,向(3)中混合溶液加入30 μL 转染稀释液,并充分吹打混匀,随后将混合后的50 μL转染复合物加入到12孔板的一个孔中,摇动混匀培养板中的液体,可根据需要的孔量进行配制转染复合物。

表1 siRNA转染复合物配制表格(50μL为例)

siRNA溶液

(20 μM)

Booster

PolyToolTM siRNA Transfection Reagent

转染稀释液

(PBS/Opti MEM/细胞培养液)

siRNA转染复合物总体积

siRNA转染复合物

(1 μM)

2.5 μL

12.5 μL

5 μL

35 μL

50 μL

注:如需配制其他体积siRNA转染复合物,在siRNA浓度不变的情况下,等比例调节各组分体积即可,注意最小配制体积30 μL。建议siRNA浓度为20 μM,以便取得最佳沉默效果。

5.检测转染效果24小时后检测细胞基因沉默水平。

根据下表配制转染试剂和siRNA混合

细胞培养板

接种细胞数

培养基体积

每孔加入siRNA转染复合物体积
(μL)

最小配制孔数

96孔板

0.8-1.2×104

100μL 5 6
48孔板

3.5-5.0×104

250μL 10 3
24孔板

0.8-1.0×105

 500μL  25 2
12孔板

1.0-2.0×105

1.0mL 50 1
6孔板

2.0-4.0×105

2.0mL 100 1

注:按上表加入siRNA转染复合物,各孔siRNA终浓度为所配制转染复合物siRNA浓度的1/20.即1 μM

 

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