• PolyTool™ siRNA Transfection Reagent
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PolyTool™ siRNA Transfection Reagent

No.BM350104

PolyTool™siRNA Transfection Reagent(siRNA专用转染试剂)是一款新型、高性能的siRNA专用转染试剂,具有较强的siRNA压缩能力,能够将RNA高效率、无损地递送到真核细胞中。与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、效率高、稳定性好、转染操作简单、重复性好等优点。

规格: 300 μL/1 mL/5mL

价格: 询价

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产品详情

产品介绍

PolyTool™siRNA Transfection Reagent(siRNA专用转染试剂)适用范围:众多贴壁细胞系的siRNA转染。在各种常规或难转细胞中均可得到较高的转染效率,且性能稳定。

产品特点 

1.不受血清影响:转染前无需换液,转染效果不受培养基中血清影响;

2.毒性低:低细胞毒性,转染后对细胞活力影响极小;

3.稳定性高:本产品可稳定保存2年;

4.操作简单:转染只需4步,使用方法简便;

5.低siRNA用量:使用更少的siRNA,依然有更高的沉默效率。


实验流程

1.细胞种板:参考附录推荐密度接种细胞,使转染时细胞密度达到60%~70%。

2.细胞转染:

(1)使用本转染试剂前涡旋5秒,然后取X μL转染试剂至添加好Y μL opti-MEM培养基的无菌EP管中,吹打混匀;

(2)向(1)所述溶液中添加Z μg质粒DNA(建议质粒siRNA浓度配制为100 ng/μL或10 μM),吹打混匀;

(3)将(2)所述溶液室温静置10~15 分钟;

(4)将(3)所述溶液加入(1)所述细胞培养板的一个孔中(可根据需要的孔量配制母液)。

根据下表配制转染试剂和siRNA混合

细胞培养板

X

转染试剂体积

(μL)


 

Y

opti-MEM体积

(μL)


 

Z

siRNA

100 ng/μL

10 μM

96孔板

0.4或0.8

10 0.1μg 10 pmol
24孔板

2或4

50 0.5μg 40 pmol
12孔板

4或8

100 1μg 80 pmol
6孔板

8或16

200 2μg 160 pmol

3.检测转染效果:37℃培养24-48小时后检测基因沉默效率。
附录:

可通过改变细胞密度、siRNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化

不同培养板所需转染试剂和siRNA的用量

细胞培养板

接种培养基 (mL)/孔

贴壁细胞数/孔

opti-MEM

培养基体积

(μL)

siRNA用量

(μg)

转染试剂体积(μL)

96孔板

0.1

0.8-1.2×104

10

0.1-0.2

0.4-0.8

24孔板

0.5

3.5-5×104

50

0.5-1

2-4

12孔板

1

0.8-1×105

100

1-2

4-8

6孔板

2

1.5-2×105

200

2-4

8-16

60mm

5

\

500

4-8

32-64

100mm

10

\

1000

10-20

80-160


 

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