胰蛋白酶（EC 3.4.21.4）是一种丝氨酸蛋白酶，酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组胰蛋白酶是利用基因工程菌表达并采用层析色谱法纯化获得，其氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致，分子量为24 kDa，最适pH为7.0-9.0。可以替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中，例如：重组胰岛素生产、细胞培养、细胞发酵、蛋白质的酶解、测序和各种组织的细胞分离等。
目前市面上常用的细胞消化液包括非酶法的EDTA和酶法的Trypsin、TrypLE和NeptryTM消化液：EDTA属于非酶法解离细胞，能够保持细胞活力和回收率，快速安全；Trypsin是一种丝氨酸蛋白酶，可水解赖氨酸或精氨酸羧基侧蛋白质，是常用的动物源性胰蛋白酶，但在细胞消化的同时容易引入外源污染；TrypLE是一种非动物源性重组胰蛋白酶，适用于解离多种贴壁哺乳动物细胞，可切割赖氨酸和精氨酸C-末端上的肽键，替代胰蛋白酶。其极高的纯度提高了特异性，减少了一些胰蛋白酶提取物中存在的其他酶对细胞可能造成的损害；中科百抗NeptryTM消化液是一种来源于Fusarium oxysporum的胰蛋白酶样蛋白酶，该酶是从大肠杆菌中表达纯化而来，与胰蛋白酶的酶切位点和pH活性范围一致，能对蛋白序列中精氨酸和赖氨酸的羧基端肽键进行切割。该重组胰蛋白酶在细胞实验中已被证实可以有效地解离贴壁生长哺乳动物细胞，具有与猪胰蛋白酶相似的解离动力学，并表现出较低的细胞毒性。纯度分析表明，NeptryTM消化液相较于传统胰蛋白酶，纯度更高，分子更加稳定，活性保持更加优异。
各种细胞消化液性能比较如下表：
| 项目 |
Neptry
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TrypLE
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Trypsin
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EDTA
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| 代表品牌 |
BestopMab
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Thermo、Gibco、碧云天
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默克、sigma
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Thermo、碧云天...
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| 作用方式 |
酶法消化
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酶法消化
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酶法消化
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非酶法消化 |
| 来源 |
尖孢镰孢菌
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真菌
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猪、牛、羊胰脏
蛋白水解酶
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化学螯合剂
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| 表达载体 |
大肠杆菌
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/ |
无 |
无 |
| 蛋白种类 |
胰蛋白酶类似物
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胰蛋白酶类似物
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胰蛋白酶
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无 |
| 产品形式 |
液体
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液体/粉末
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液体/粉末
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粉末 |
| 产品特点 |
1.非动物源性重组蛋白酶；
2.稳定性更高（室温稳定）；
3.纯度更好；
4.消化更温和；
5.细胞毒性更低；
6.方便使用（操作简便，无需抑制剂，无需改变消化流程）。
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1.非动物源性重组蛋白酶；
2.稳定性高（室温稳定）；
3.纯度高；
4.消化作用温和；
5.细胞毒性低；
6.无需使用抑制剂。
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1.动物来源；
2.稳定性低，-20℃保存；
3.纯度偏低；
4.批次间差异大；
5.细胞损伤大；
6.需要使用Trypsin抑制剂。
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1.非动物源：
2.对细胞友好，无毒性；
3.操作简单；
4.维持细胞功能。
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| 产品应用 |
1.用于组织块的消化解离和原代细胞的获取；
2.用于贴壁细胞的传代消化和收获；
3.用于微载体方法培养的细胞消化和收获。
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适用于解离多种贴壁哺乳动物细胞，包括CHO、HEK293、A549、原代人角质化细胞和胚胎干细胞。
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广泛用于组织和单层细胞的解离。
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可以单独用于胚胎干细胞的解离，也可以和TrypLE、Trypsin联合使用。
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