Apr.2024 16
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1640培养基变色的原因,你了解吗
细节
RPMI 1640是一种常用的细胞培养基,最初由Moore等人于1966年在美国罗斯维尔公园肿瘤研究所(Roswell Park Memorial Institute)开发,并因此得名。最初设计用于淋巴细胞培养,但现已被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和癌细胞等。在实验时,因为1640培养基使用量大,通常会采购几瓶甚至几十瓶用于实验,但是有时会发现,1640培养基放置时间久了,颜色会变粉或变深,那变色的1640培养基还能使用吗?本文将为您重点介绍1640培养基变色的原因以及是否还能使用。
一、1640培养基变色的原因
1.碳酸氢钠分解:RPMI 1640培养基主要含有葡萄糖、碳酸氢钠、酚红等成分。其中造成细胞培养基变色的主要成分是充当缓冲体系的碳酸氢钠。这是由于培养基开封后或密封不严,NaHCO3会分解成CO2溢出,导致培养基偏碱,导致培养基变成粉色、紫色、玫瑰红等颜色。这时可以将培养瓶拧松放置于CO2培养箱中一段时间,培养基的颜色会恢复正常。酸碱度的变化会使颜色发生变化。
2.酚红变化:酚红也会影响RPMI 1640培养基的颜色。当培养基的pH偏高时,酚红会发生颜色变化。细胞在培养基中产生代谢产物,这些物质也会影响酸碱度。因此,RPMI 1640培养基变色的根本原因就是培养基的pH值发生了变化。当pH值大于7时,颜色会偏向紫色;反之,如果pH值小于7,则颜色偏向黄色。
3.补充物的添加:RPMI 1640培养基中通常需要添加一些补充物,例如生长因子、蛋白质、10%胎牛血清、酚红等,根据所培养的细胞类型进行适宜的调整。例如,添加酚红可以更直观地观察pH值的变化,有利于科研人员及时调节pH值。另外,适当添加双抗溶液可以防止细胞污染,而10%胎牛血清可以保证培养基中的营养成分适宜。
二、1640培养基变色是否还能使用
如果RPMI 1640培养基变色,首先检查pH值是否正常,然后根据实验需求添加适当的补充物。如果培养基的颜色持续变化,建议重新调pH值或更换新的培养基。
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