Apr.2024 12
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干货|10%胎牛血清配制方法

细节

胎牛血清是天然的生物制品,它常常被应用在培养基的成分补充中,在添加过程中我们也要注意一些操作问题。本文将对10%胎牛血清配制步骤进行探讨,以配制100ml10%胎牛血清的RPMI 1640培养基为例,让我们一起来看看吧!

1)材料准备:无菌的RPMI 1640培养基,10ml胎牛血清、无菌的移液器和吸头、无菌的培养瓶、无菌的培养皿、37℃、5% CO2的恒温培养箱、超净工作台;

2)胎牛血清的解冻:将胎牛血清提前进行解冻;

3)恢复培养基温度:将RPMI 1640培养基温度恢复到室温温度;

4)计算所需体积:配制100ml含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基,需要10ml的胎牛血清,90mlRPMI 1640培养基;

5)胎牛血清的添加:使用1000μl规格的移液器和洗头,将胎牛血清加到无菌的培养瓶中;

6)培养基的添加:再使用1000μl规格的移液器和洗头,将RPMI 1640培养基加到上一步骤的培养瓶中,使总体积达到100ml

7)摇晃混匀:轻轻的摇晃培养瓶,使胎牛血清与RPMI 1640培养基充分混合在一起;

8)细胞接种:将含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基分装到无菌的培养皿中,然后将细胞接种到RPMI 1640培养基中;

9)观察培养:将培养皿根据细胞类型放入CO2的恒温培养箱设置好温度、时间,观察细胞的生长状态。

以上就是10%胎牛血清的配制步骤,在配制过程中,请注意无菌操作。中科百抗提供的胎牛血清在GMP净化车间全自动灌装生产,经过三级0.1μm过滤,在严格质量控制体系下,经过病毒、支原体、内毒素等多项测试,无细菌、真菌、病毒、支原体及黑胶虫等污染,内毒素含量≤10EU/ml,血红蛋白含量≤200mg/L,批量大、批间差小,具有高质量和高稳定性。