在生命科学研究与临床诊断中，生物样本（如细胞、组织、核酸、蛋白质）的完整性直接决定了数据的可靠性与结果的真实性。从采集点到分析台，样本经历的时间与环境变化暗藏降解风险。PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）作为最基础的生理环境模拟液，凭借其稳定的渗透压（≈290 mOsm/kg）和pH（7.2-7.4）特性，成为维持样本短期稳定性、保障运输过程安全的关键载体。
一、PBS维持生物样本稳定的核心机制
·精准匹配细胞内环境（等渗），防止细胞在悬液或湿润环境中脱水皱缩或吸水涨破，尤其对脆弱细胞（如原代细胞、精子细胞）和组织切片至关重要。
·磷酸盐缓冲体系有效中和样本代谢产生的酸性产物或环境波动，维持中性环境（pH 7.2-7.4），显著减缓核酸（特别是RNA）的酸水解、蛋白质的变性失活及酶的自降解。
·提供生理浓度的Na⁺、K⁺、Cl⁻等离子，维持细胞膜电位和蛋白构象稳定，避免离子失衡引起的功能损伤。
·浸润样本表面形成湿润微环境，减少干燥损伤；在冷冻过程中可稀释高浓度溶质（如DMSO），减轻冰晶损伤。
二、关键应用场景与操作规范
1.细胞样本的短期保存与运输
·悬浮细胞：
应用：收集后离心，用预冷（4℃）无菌PBS（含1% BSA或FBS更佳）重悬，置于冰上或4℃短期（通常<24h）保存/运输。
优势：维持细胞活性与形态，优于纯水或培养基（避免营养消耗/酸化）。
·贴壁细胞：
应用：从培养皿消化收集后，PBS洗涤去除血清（抑制胰酶），用少量PBS重悬后冰上运输或加入适量冷冻保护剂（如含10% DMSO的FBS）冻存。
注意事项：避免长时间（>1h）暴露于无营养PBS，尤其对原代细胞。
2.组织样本的保存与转运
·新鲜组织块：
应用：离体后迅速浸入足量冰冷无菌PBS（4℃），运输全程保持低温。适用于后续做冰冻切片、核酸/蛋白提取或原代培养。
优势：比干冰更温和，防止冻融损伤；比生理盐水缓冲能力更强，更好对抗组织酸化。
石蜡包埋前处理：
应用：固定（如福尔马林）后，PBS充分冲洗（>24h，多次换液），彻底清除固定剂残留，是保证后续染色质量（如IHC）和核酸提取成功的关键步骤。
3.蛋白质与抗体样本
·稀释与稳定：
应用：PBS常用于稀释纯化蛋白、抗体或血清样本用于短期实验（如ELISA、WB）。其温和离子环境有助于维持蛋白溶解性和构象。
关键：需添加稳定剂（如0.1% BSA, 0.05% NaN₃防腐）并分装冻存以延长保存期。
·保存缓冲液基础：
常用抗体保存缓冲液多以PBS为基础（如PBS+50%甘油），平衡渗透压与pH。
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