一、PBS缓冲液的基本组成与作用
PBS是一种等渗、pH稳定的缓冲液，主要由以下成分组成：
-磷酸钠（Na₂HPO₄、NaH₂PO₄）：维持pH稳定性（常用pH为7.4）。
-氯化钠（NaCl）：保持渗透压接近生理水平（约300 mOsm）。
-氯化钾（KCl）（可选）：部分配方中用于模拟更接近细胞内外的离子环境。
主要作用：维持细胞正常形态，稳定生物分子活性，避免细胞渗透压失衡导致损伤。
二、PBS缓冲液的标准配方（1×，pH 7.4）
以下为常用1升PBS的配方（不含Ca²⁺和Mg²⁺）：
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成分 |
质量（g） |
|
NaCl |
8.0 |
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KCl |
0.2 |
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Na₂HPO₄·12H₂O |
2.9 |
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KH₂PO₄ |
0.24 |
三、PBS缓冲液的配制步骤
1.称量：用分析天平称取各成分，精度建议±0.001 g。
2.溶解：将化学品加入约800 mL去离子水中，用磁力搅拌器充分溶解。
3.调pH：使用pH计检测溶液pH，必要时用1 M HCl或1 M NaOH微调至7.4 ± 0.05。
4.定容：补加去离子水至1 L刻度线。
5.预过滤：建议通过0.45 µm或0.22 µm滤膜去除颗粒杂质。
四、PBS缓冲液的灭菌方式
PBS在生命科学实验中常与细胞或蛋白质直接接触，因此灭菌是关键环节。常用方法包括：
1.高压蒸汽灭菌
-条件：121°C，15 psi，15-20分钟。
-优点：彻底灭菌，适合粉末配制后的液体PBS。
-注意：长期高温可能导致磷酸盐成分微量沉淀。
2.无菌过滤（Sterile Filtration）
-条件：0.22 µm微孔滤膜过滤。
-优点：适合热敏性成分或对pH高度敏感的PBS。
-注意：需严格无菌操作，避免二次污染。
五、PBS缓冲液的储存条件与稳定性
-室温储存：非无菌PBS，可在洁净密封容器中室温保存约1-2个月。
-4°C冷藏：无菌PBS（液体）推荐冷藏，可延长至6-12个月。
-粉末PBS：密封避光、室温保存，一般稳定期可达2-3年。
-使用注意：使用前检查是否有沉淀或pH变化，如有异常应废弃。
六、实用建议
1.根据实验需求准备不同规模批量，减少长期储存引起的质量波动。
2.细胞培养及蛋白检测建议使用无菌、低内毒素PBS，保障实验可靠性。
3.对于高通量实验室，可使用预制的浓缩液或即用型PBS，减少人为误差与时间成本。
4.配制记录应保留，方便批次质量追溯。
PBS虽为基础缓冲液，但在实验可重复性与数据可靠性中扮演重要角色。科学的配制、正确的灭菌方式以及合理的储存管理，将直接影响实验成败。我们可为不同科研需求提供粉末型与即用型PBS，助您在实验工作中做到高效与稳定的平衡。
