Nov.2023 01
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拭子DNA提取方法
细节

口腔拭子是一种从人体口腔采集样本的棉签,在进行口腔拭子检查时,医疗服务提供者会用拭子轻轻擦拭脸颊内侧,以收集颊上皮细胞。这是一种相对非侵入性的DNA样本采集方法,可用于基因检测或法医分析。

口腔拭子采集套装通常包含海绵拭子或植绒拭子、保存液管、手套、标签和说明书。用拭子擦拭脸颊内侧并摩擦5-10秒钟以收集细胞,注意不要让拭子尖端接触到脸颊内侧以外的任何表面。然后将拭子放入收集管中,晾干并贴上标签。口腔拭子采集可由医疗服务提供者完成,也可由个人按照简单的说明自行完成。这种方法快速、无痛,而且能采集到高质量的DNA

口腔拭子DNA提取和纯化主要有两种方法:

传统的DNA提取试剂盒利用蛋白酶K消化,然后进行酒精沉淀或柱吸附来分离DNA。这些试剂盒虽然有效,但涉及多个试管和步骤。

新型试剂盒采用新型固相化学方法,只需一步就能直接从拭子中提取DNA,从而减少了操作时间和塑料废弃物。例如中科百抗离心柱法口腔拭子DNA提取试剂盒,本产品适用于从湿拭子和干拭子样本中提取基因组DNA。试剂盒基于硅膜柱纯化技术,利用特殊硅基质吸附材料和相应的缓冲液体系特异性吸附DNA,通过清洗和离心步骤以有效去除杂质和各种酶抑制剂,最后使用低盐缓冲液洗脱获得纯化的DNA产物。使用本产品纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCRRT-PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记、NGS等下游分子生物学实验。

在传统和新型试剂盒中,纯化的DNA被洗脱到与PCR和测序等下游应用兼容的低盐缓冲液中。选择优化的DNA纯化策略可最大限度地提高来自口腔拭子DNA提取的产量和质量。

在使用中科百抗离心柱法拭子基因组DNA提取试剂盒的注意事项:

1)提前准备恒温振荡器 (或水浴锅)并预热至70℃,建议设置震荡速度为1,000 rpm/min(若使用水浴锅操作,期间需将内容物颠倒混匀2-3次)。

2)Buffer AW1Buffer AW2在使用前需按照试剂瓶标签所示加入无水乙醇进行稀释后使用。