转染试剂和DNA的比例是影响转染效率和细胞存活率的重要因素。不同的转染试剂和细胞类型需要不同的优化比例，但一般来说，转染试剂和DNA的比例是以微克（µg）DNA与微升（µL）转染试剂的比值来表示。以下是中科百抗的转染试剂与DNA的比例推荐：
PEI是一种常用的阳离子聚合物转染试剂。PEI和DNA的比例通常为1:1至3:1（µg:µL）。具体步骤如下：
（1）制备PEI溶液：通常使用无菌水或PBS配制PEI工作溶液（如1 mg/mL）。
（2）混合比例：对于每1 µg的DNA，使用1至3 µL的PEI溶液。例如，使用2 µg的DNA，加入2至6 µL的PEI溶液。
（3）混合方法：将PEI溶液缓慢加入DNA溶液中，轻轻混合并在室温下孵育15-30分钟。
PolyToolTM DNA Transfection Reagent是一款DNA专用型转染试剂，可用于质粒DNA的高效转染。适用于众多贴壁或悬浮细胞株的DNA转染。
（1）制备PolyToolTM DNA Transfection Reagent溶液：将PolyToolTM DNA Transfection Reagent稀释在无血清培养基中。比例可参考下表：
|
细胞培养板
|
转染试剂体积
(μL)
|
opti-MEM体积
(μL)
|
质粒DNA/siRNA
(μg)
|
|
96孔板
|
0.15或0.3
|
10 |
0.1
|
|
24孔板
|
0.75或1.5
|
50
|
0.5
|
|
12孔板
|
1.5或3
|
100
|
1
|
|
6孔板
|
3或6
|
200
|
2
|
（2）混合比例：对于每1 µg的DNA，使用1.5或3 µL的PolyToolTM DNA Transfection Reagent。
（3）混合方法：将质粒DNA添加到稀释后的PolyToolTM DNA Transfection Reagent溶液中，吹打混匀并在室温下孵育10~15分钟，然后加入细胞培养板中。
由于不同的细胞类型和实验条件可能需要不同的转染比例，建议在实际实验中进行优化：
（1）起始比例：可以选择常规推荐的比例作为起始点，如1:1至3:1。
（2）梯度试验：进行一系列不同比例的梯度试验，观察转染效率和细胞存活率，找出最佳比例。
（3）重复实验：多次重复实验，以确保结果的稳定性和可靠性。
转染试剂和DNA的最佳比例取决于具体的试剂类型、DNA量和细胞类型。通过优化转染条件，可以显著提高转染效率和实验成功率。在实际操作中，建议参考转染试剂提供的说明书，并结合具体实验需求进行合理的优化和调整。
