将转染试剂聚乙烯亚胺（PEI）与DNA混合，是进行细胞转染实验不可或缺的步骤。PEI作为一种带正电荷的聚合物，能够与DNA紧密结合，有助于DNA成功进入细胞完成基因转染。下面是PEI和DNA混合的一般步骤：
1.制备PEI溶液：如果PEI为固体粉末，首先需制备一定浓度的PEI溶液。通常采用无菌的磷酸盐缓冲液PBS或去离子水稀释PEI，调配成所需浓度的工作液。
2.配制DNA溶液：将待转染的DNA溶解于适当缓冲液中，制备成所需浓度的DNA溶液。确保DNA质量纯净、完整，避免因DNA质量问题导致转染效率下降。
3.缓慢滴加PEI溶液至DNA溶液中：通常情况下，将预先准备好的PEI溶液缓慢滴加至DNA溶液中，并轻轻搅拌混合，确保PEI与DNA充分均匀混合。
4.孵育混合物：将PEI与DNA混合液静置孵育一段时间，一般为15-30分钟，使PEI与DNA充分结合形成复合物。
5.转染细胞：将PEI-DNA复合物加入含有待转染细胞的培养基中，轻轻摇动培养皿，确保复合物均匀覆盖在细胞表面。
需要注意的是，在PEI和DNA混合过程中，应避免剧烈搅拌或产生气泡，以免破坏复合物的形成。此外，要根据具体实验要求和细胞类型优化调整PEI-DNA复合物的浓度和比例，以提高转染效率和细胞存活率。正确的PEI和DNA混合操作是确保细胞转染实验顺利进行并获得可靠结果的关键步骤之一。
