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胎牛血清出现沉淀怎么办?

Dec 27th,2024 520 浏览量

胎牛血清Fetal Bovine Serum, FBS)中出现沉淀是较为常见的现象,通常不影响其使用。沉淀的成分有多种类型,主要有纤维蛋白、磷酸钙还有一些其它成分。沉淀的形成与胎牛血清的成分、储存条件及处理方式有关。

(一)胎牛血清出现沉淀的主要原因

1.胎牛血清成分

  • 高蛋白浓度:胎牛血清中含有大量的蛋白质(如白蛋白、免疫球蛋白等),这些蛋白质在特定条件下容易聚集形成沉淀。
  • 盐类和脂质:血清中天然存在一些无机盐和脂类物质,这些成分可能在储存或使用过程中析出形成沉淀。

2.温度变化的影响

胎牛血清在反复冻融过程中,蛋白质容易变性或聚集,导致沉淀形成。

3.血清处理方式问题

过滤不彻底:生产胎牛血清时,可能未完全过滤掉细胞碎片、纤维蛋白等颗粒物,储存后会逐渐形成沉淀。

4.pH变化

胎牛血清的pH值受储存条件或环境变化的影响。当pH值发生变化时,某些蛋白质可能发生沉淀。

(二)胎牛血清出现沉淀的解决方法

1.温和处理

  • 血清解冻时应采取逐步解冻的方式,从-20℃取出后,先置于2-8℃冰箱缓慢解冻,而不是直接置于室温或37℃水浴中,避免蛋白质快速变性产生沉淀。在解冻过程中,需注意时不时缓慢摇晃瓶子,减少沉淀的产生。
  • 避免反复冻融,建议将血清分装成小体积保存。

2.离心去除沉淀

如果沉淀较多,可以低速离心10-15分钟,去除沉淀后继续使用。

3.过滤

如果担心沉淀影响实验,可用0.22 µm过滤器对血清进行过滤处理。

4.混匀操作

血清使用前轻轻混匀,避免直接摇晃或剧烈震荡,以减少不必要的气泡和沉淀。

一般情况下,胎牛血清的沉淀对实验无显著影响,因为这些沉淀主要由不溶性蛋白或无害颗粒组成。只要血清经过正确处理,仍然可以正常使用。但如果胎牛血清出现异常颜色变化或异味,需谨慎使用或更换。

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