Apr.2024 03
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胎牛血清的灭活方法
细节
一、何为血清灭活?
一般情况下,所谓血清灭活即指血清的热灭活。在血清解冻后,通过水浴锅的加热方法进行灭活。常规灭活温度介于45℃62℃之间,而时间则因情况而异,通常为15分钟至60分钟不等。其中,最常用的是以56℃加热处理30分钟。
二、为何需要进行血清灭活?
热灭活的目的在于去除血清中对热敏感的成分,如补体等物质,同时也起到了灭活血清中可能存在的支原体的作用。补体是一种存在于人和脊椎动物血清及组织液中的蛋白质,它对热不耐性,可构成一个庞大的补体系统,参与免疫应答和炎症反应。激活的补体可参与细胞溶解过程,刺激平滑肌收缩、细胞和血小板释放组胺,并激活淋巴细胞和巨噬细胞。血清的最佳工作温度一般约为37℃左右,因此热灭活对血清而言也是一种不小的伤害,会导致一些营养成分的流失,进而影响细胞状态。正规的胎牛血清无需进行热灭活,但在某些特殊情况下,建议热灭活去除血清可能带来的补体系统干扰。
三、血清灭活的方法
1.选取一个与血清瓶规格相同的瓶子(作为对照瓶),并在瓶内加入与血清等体积相当的水。
2.进行温度预试:接通水浴箱电源,调节温度控制钮,使水浴箱保持在56℃的温度。
3.进行血清灭活:将血清瓶与带有温度计的对照瓶(以确保测试温度的准确性)一同放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时,设定定时器为30分钟。
4.血清灭活后,根据每次实验所需的血清使用量进行分装,并进行低温保存。
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