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避免细胞污染——胎牛血清的灭菌与储存最佳实践

Nov 14th,2025 453 浏览量

细胞培养是生命科学研究的基石,而胎牛血清FBS)作为关键培养基添加剂,其无菌性与稳定性直接决定实验成败。污染可能导致细胞死亡、数据偏差甚至项目停滞。掌握血清处理与储存的核心技术,是保障科研与生产连续性的第一道防线。
一、灭菌处理:构建无菌屏障
·热灭活精准控制
针对特定实验需求(如干细胞培养),采用56℃水浴30分钟处理可有效灭活补体系统。需严格监测温度波动范围≤1℃,避免蛋白质变性失活。
·终端过滤双保险
0.1μm三级膜过滤系统可截留支原体及微小颗粒,过滤后取样执行14天厌氧/需氧培养验证,确保无菌水平达ISO 13408标准。
二、科学储存:维持生物活性黄金法则
·深度冷冻链管理
-20℃储存有效期18个月,-70℃超低温储存延长至5年。采用梯度冷冻工艺(每分钟降1℃)防止冰晶损伤,复苏时37℃水浴震荡≤2分钟。
·分装防冻融损伤  
实验证实,反复冻融超3次会导致IGF-1活性下降40%。建议按周用量分装50ml/瓶,启用后4℃保存不超过30天。
三、全程质控:构筑安全防线
·多维度检测体系
  每批次执行: 
   -微生物检测(细菌/真菌/支原体)
   -病毒检测
   -内毒素水平(≤10EU/ml
   -血红蛋白残留(≤200mg/L)  
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