PEI转染试剂HEK293悬浮细胞转染说明书

PEI转染试剂是一种常用于基因转染的高分子载体。它通过与带负电荷的核酸分子结合，形成复合物，从而将这些复合物引入细胞中。PEI转染试剂可广泛应用于多种细胞系的DNA转染，比如HEK-293、CHO细胞等。本文是一篇PEI转染试剂进行HEK293悬浮细胞转染的说明书，主要介绍了转染需要用到的试剂和步骤。

一、所需材料

1.PEI转染试剂（1mg/mL）

2.37℃预热的HEK293培养基

备注：血清会抑制转染。请使用减血清，无血清(“SFM”)或化学成分限定(“CDM”)培养基。

3.HEK293细胞培养，活细胞密度为1.5-2.0×10⁶cells/mL

4.含有目的基因的转染级质粒DNA(pDNA)，每毫升待转染培养物含1 μg

二、操作步骤

1.转染前，确保细胞存活率大于95%且活细胞密度为1.5-2.0×10⁶ cells/mL。

2.将活细胞密度稀释至1.05×10⁶ cells/mL。

3.将1 μg pDNA转移到无菌无酶离心管中。用新鲜培养基稀释至20 μg/mL（5%最终培养体积）。

4.将3 μL 1 mg/mL的PEI转染试剂转移到无菌无酶离心管中。使用培养基稀释至60 μg/mL（5%最终培养物体积）。

6.每90 mL待转染培养物使用10 mL pDNA/PEI混合物。搅拌的同时逐渐将混合物加入培养物中。

7.37℃，5%CO₂条件下培养细胞。

三、推荐用量

下表中列出了推荐试剂量。如果进行其他相似的转染(例如病毒转染)，建议在优化范围内对这些参数进行协同优化。

如果您想了解更多关于PEI转染试剂的问题，欢迎咨询中科百抗。